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이전 글에서는 3D cell culture 시장의 현황과 프로메가의 3D assay 제품 포트폴리오를 소개하면서 3D 기술의 발전과 적용
가능성을 논의한 바 있습니다. 이번 글에서는 3D 모델에서
생물학적인 변화를 실시간으로 분석하는 것이 왜 중요한지에 대해 다루고자 합니다.
3D cell culture 모델은 기존의 2D 모델에 비해 생체 환경을 보다 정확하게 모사하여 더 신뢰할 수 있는 데이터를 제공합니다. 하지만 이러한 모델은 배양 과정이 복잡하고, 비용 및 시간이 많이 소요되는 경향이 있습니다. 이러한 문제를 해결하기 위해서는 한 번의 실험에서 가능한 많은 데이터를 얻는 것이 중요하며, 이를 위해 실시간 kinetic 분석이 필수적입니다. 이번 글에서는 3D assay에서 kinetic 분석이 중요한 이유를 살펴보고, 최적의 솔루션을 제안합니다.
◈왜 Kinetic 분석이 중요한가?
3D cell culture 실험을 수행하는 연구자들은 실험을 통해 정확하고 깊이 있는 정보를 얻고자 합니다. Kinetic assay는 살아있는 세포 내에서 생물학적 반응을 시간에 따라 측정하는 방법으로, 특히 복잡한 배양 과정이 필요한 3D cell culture에서 중요한 역할을 할 수 있습니다. 다음과 같은 질문들을 고려할 수 있습니다 :
시간 경과와 다양한 약물 농도에 따른 실험을 계획 중인가요?
→ Kinetic 분석을 통해 시간에 따른 변화를 실시간으로 모니터링하여
더 정교한 데이터를 얻을 수 있습니다.
하나의 well에서 더 많은 데이터를 얻고 싶으신가요?
→ Kinetic assay는 동일한 샘플에서 시간에 따른 다양한
데이터를 수집하여 연구 효율성을 높입니다.
Primary cell 또는 환자 유래 세포 등 귀중한
세포를 사용하고 계신가요?
→ Kinetic assay는 소중한 샘플을 최대한 활용하여 보다
많은 결과를 도출할 수 있습니다.
실험에 필요한 비용과 노력을 절감하고 싶으신가요?
→ Kinetic 분석은 여러 번의 실험 대신 한 번의 실험으로 더
많은 데이터를 제공하여 비용과 시간을 절약할 수 있습니다.
약물 스크리닝 실험을 계획하고 계신가요?
→ 실시간 데이터는 약물의 작용 메커니즘을 보다 명확하게 이해하는 데 도움을 줍니다.
이 질문 중 하나라도 ‘Yes’라고 답하셨다면, 3D cell culture 연구에 실시간 kinetic assay를 고려할 시점입니다. Kinetic assay는 특정 약물이 cell viability에 미치는 영향을 조사할 때, end-point assay로는 놓칠 수 있는 중요한 정보를 제공합니다. 시간에 따른 변화를 분석함으로써 약물의 작용 메커니즘을 보다 명확하게 이해할 수 있습니다.
시간대 별로 실험 plate를 여러 개 준비해 본 경험이 있으신가요? 위의 그림처럼 kinetic assay를 활용하면, 하나의 plate만으로도 다양한 시간대의 데이터를 수집할 수 있어 세포, 비용, 그리고 실험 시간 및 연구자의 노력 모두를 절약할 수 있습니다. 이는 연구 효율성을 높이는 동시에, 더 적은 리소스로 더 많은 정보를 얻을 수 있는 효과적인 방법입니다.
◈3D cell culture 모델에서 kinetic 분석이 가능한가?
그렇다면, 3D 모델에서도
kinetic 분석을 활용할 수 있을까요? 정답은 “그렇습니다” 입니다. 모든 3D assay가 kinetic 분석에 적합하지는 않지만, 프로메가는 다음과 같은 다양한 cell health assay를 통해 3D 모델에서도 kinetic assay를 효과적으로 수행할 수 있는 솔루션을 제공합니다.
- Cell viability assay: RealTime-Glo™ MT Cell
Viability Assay
- Cytotoxicity assay: CellTox™ Green
Cytotoxicity Assay, LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay
- Apoptosis assay: RealTime-Glo™ Annexin V
Apoptosis and Necrosis Assay
- Metabolism assay: Metabolite assay (배양액에서
측정하고자 하는 경우 적은 양의 배양액 샘플링을 시간별로 진행하여 semi-kinetic 분석이 가능함)
실험 예시: RealTime-Glo™ Annexin V Apoptosis
and Necrosis Assay
HepG2 cell spheroid에서 약물에 의한 apoptosis를 kinetic으로 측정한 결과
Ultra-low attachment plate에서 배양한 HepG2 spheroid (450 µm 크기)를 white plate로 옮긴 후, RealTime-Glo™ Annexin V
Apoptosis and Necrosis Assay를 진행하였습니다. Paclitaxel을
처리한 후 6 시간, 22 시간, 30 시간, 48 시간에 발광(Annexin
V; 측정 값이 올라갈수록 apoptosis가 증가함)과
형광(DNA; 값이 올라갈수록 necrosis가 증가함)값을 측정한 결과, 시간에 따른 세포 사멸 과정을 성공적으로 모니터링할
수 있었습니다.
Kinetic assay는 3D
cell culture에서 중요한 역할을 하며, 실시간 데이터를 통해 세포의 생물학적 변화를
보다 깊이 있고 정확하게 분석할 수 있습니다. 특히 end-point
분석으로는 놓칠 수 있는 시간에 따른 중요한 데이터를 제공함으로써, 약물 반응 및 세포
내 신호 전달을 명확히 이해하는 데 큰 도움을 줍니다.
프로메가의 발광 기반의 assay는 생물학적 변화를 민감하게 측정할
수 있는 최적의 솔루션을 제공합니다. 이를 통해 연구자의 실험의 복잡성을 줄이고, 세포와 자원을 효율적으로 활용하며, 비용 절감과 동시에 효율을 극대화할
수 있습니다.
지금 프로메가의 kinetic assay 솔루션으로 3D cell culture 연구에서 새로운 가능성을 탐구하고, 보다
신뢰할 수 있는 데이터를 확인해 보세요.
프로메가의 3D assay 포트폴리오는 복잡한 3D cell culture 모델에서 유전자 발현 변화,
genome 분석을 통해 정확한 결과를 얻을 수 있도록 지원합니다. 각 assay에 대한 세부 정보와 응용 방법에 대해
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[출처] [3D Assay] 마지막 이야기: 3D assay에서 kinetic 분석이 중요한 이유|작성자 Promega Korea